तपाईंको ब्राउजरमा जाभास्क्रिप्ट हाल असक्षम पारिएको छ। जाभास्क्रिप्ट असक्षम पारिएको बेला यस वेबसाइटका केही सुविधाहरूले काम गर्ने छैनन्।
आफ्नो विशिष्ट विवरण र रुचिको विशेष औषधिको साथ दर्ता गर्नुहोस् र हामी तपाईंले प्रदान गर्नुभएको जानकारीलाई हाम्रो विस्तृत डाटाबेसमा रहेका लेखहरूसँग मिलाउनेछौं र तुरुन्तै तपाईंलाई PDF प्रतिलिपि इमेल गर्नेछौं।
बान-ल्यान-जेन ग्रेन्युलहरूले पेटको माइक्रोबायोटालाई परिमार्जन गरेर र आन्द्राको SCFA व्युत्पन्न-GLP-1 उत्पादन पुनर्स्थापित गरेर मुसाहरूमा डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिसलाई कम गर्छ।
जिओ पेङ,१-३,*ली शी,४,*झेङ लिन,३,५ डुआन लिफाङ,१ गाओ झेङसियान,२,५ डिहु,१ ली जी,६ ली सियाओफेङ,६ शेन सियाङचुन,५ सियाओ हाइताओ२१पेकिङ विश्वविद्यालय शेन्जेन अस्पताल फार्मेसी विभाग, शेन्जेन, जनवादी गणतन्त्र चीन; २शेन्जेन विश्वविद्यालय स्वास्थ्य विज्ञान केन्द्र फार्मेसी स्कूल, शेन्जेन, जनवादी गणतन्त्र चीन; ३गुइझाउ मेडिकल युनिभर्सिटी इन्जिनियरिङ टेक्नोलोजी अनुसन्धान केन्द्र जातीय चिकित्सा र परम्परागत चिनियाँ औषधि विकास र अनुप्रयोग शिक्षा मन्त्रालय, गुइझाउ प्रान्तीय कुञ्जी प्रयोगशाला फार्मेसी, गुइझाउ मेडिकल युनिभर्सिटी, गुइयाङ, जनवादी गणतन्त्र चीन; ४ ग्यास्ट्रोएन्टेरोलोजी विभाग, पेकिङ विश्वविद्यालय शेन्जेन अस्पताल, शेन्जेन, जनवादी गणतन्त्र चीन; ५ फार्मेसी स्कूल, गुइझाउ मेडिकल युनिभर्सिटी, औषधीय बिरुवा कार्य र अनुप्रयोगको राज्य कुञ्जी प्रयोगशाला, गुइयाङ; ६ प्रयोगशाला चिकित्सा विभाग, पेकिङ विश्वविद्यालय शेन्जेन अस्पताल, शेन्जेन, चीन [email protected] शेन सियाङचुन, स्कूल अफ फार्मेसी, गुइझोउ मेडिकल युनिभर्सिटी, गुइझोउ, जनवादी गणतन्त्र चीन, ५५०००४, इमेल [email protected] उद्देश्य: GLP-१-आधारित थेरापी सूजन आन्द्रा रोगको लागि एक नयाँ उपचार विकल्प हो।Ban-Lan-Gen (BLG) ग्रेन्युलहरू एक ज्ञात एन्टिभाइरल TCM सूत्रीकरण हो जसले विभिन्न सूजन अवस्थाहरूको उपचारमा सम्भावित एन्टी-इन्फ्लेमेटरी गतिविधि प्रदर्शन गर्दछ।यद्यपि, कोलाइटिसमा यसको एन्टी-इन्फ्लेमेटरी प्रभाव र यसको कार्य संयन्त्र अझै अस्पष्ट छ।विधिहरू: मुसाहरूमा डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट (DSS)-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिस स्थापना गर्न।BLG को सुरक्षात्मक प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न रोग गतिविधि सूचकांकहरू, चोटको हिस्टोलोजिकल मार्करहरू, र प्रोइन्फ्लेमेटरी साइटोकाइन स्तरहरू प्रदर्शन गरिएको थियो। आन्द्राको माइक्रोबायोटा र आन्द्रामा BLG को प्रभावहरू सीरम GLP-1 स्तरहरू र कोलोनिक Gcg, GPR41, र GRP43 अभिव्यक्ति, आन्द्राको माइक्रोबायोटा संरचना, मल SCFAs द्वारा विशेषता गरिएको थियो। स्तरहरू, र प्राथमिक मुसा कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरू SCFA-व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादनबाट GLP-1 रिलीज। परिणामहरू: BLG उपचारले शरीरको तौल घटाउने, DAI, कोलोन छोटो पार्ने, कोलोन तन्तु क्षति, र कोलोन तन्तुमा TNF-α, IL-1β, र IL-6 को प्रोइन्फ्लेमेटरी साइटोकाइन स्तरहरूलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्‍यो। थप रूपमा, BLG उपचारले कोलोलाइटिस मुसाहरूमा कोलोनिक Gcg, GPR41 र GRP43 अभिव्यक्ति र सीरम GLP-1 स्तरहरूलाई उल्लेखनीय रूपमा पुनर्स्थापित गर्न सक्छ, र Akkermansia र Prevotellaceae_UCG-001 जस्ता SCFA-उत्पादक ब्याक्टेरियाहरू बढाएर, र Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas र Oscillibacter जस्ता ब्याक्टेरियाहरूको प्रचुरता घटाएर। थप रूपमा, BLG उपचारले कोलोलाइटिस मुसाको दिसामा SCFAs को स्तर उल्लेखनीय रूपमा बढाउन सक्छ। एकै समयमा, इन भिट्रो प्रयोगहरूले यो पनि देखाए कि BLG-उपचार गरिएको मुसाको मल निकासीले GLP-1 स्राव गर्ने प्राथमिक साना मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूलाई धेरै उत्तेजित गर्न सक्छ। निष्कर्ष: यी निष्कर्षहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG मा एन्टी-कोलाइटिस प्रभाव छ। BLG मा थेरापीको रूपमा विकास गर्ने क्षमता छ, कम्तिमा आन्द्राको माइक्रोबायोटालाई परिमार्जन गरेर र आन्द्राको SCFA-व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादनलाई पुनर्स्थापित गरेर दीर्घकालीन रिल्याप्सिंग कोलाइटिसको लागि आशाजनक औषधिहरू। कीवर्डहरू: कोलाइटिस, बान-ल्यान-जेन ग्रेन्युलहरू, पेटको माइक्रोबायोटा, छोटो-चेन फ्याटी एसिडहरू, GLP-1
अल्सरेटिभ कोलाइटिस (UC) कोलोन र मलाशयको एक दीर्घकालीन सूजन रोग हो जसमा बारम्बार पखाला, पेट दुख्ने, तौल घट्ने, र म्यूकोप्युर्युलेन्ट रगत बग्ने दिसा हुन्छ।१ हालै, पश्चिमी जीवनशैलीको बढ्दो लोकप्रियतासँगै चीन लगायत पहिले कम घटना भएका देशहरूमा UC को प्रचलन बढ्दै गएको छ।२ यो वृद्धिले जनस्वास्थ्यको लागि प्रमुख समस्याहरू खडा गर्दछ र बिरामीहरूको काम गर्ने क्षमता र जीवनको गुणस्तरमा गम्भीर प्रभाव पार्छ।उल्लेखनीय रूपमा, UC को रोगजनन धेरै हदसम्म अस्पष्ट रहन्छ, तर यो सामान्यतया स्वीकार गरिन्छ कि आनुवंशिकी, वातावरणीय कारकहरू, आन्द्राको माइक्रोबायोटा, र प्रतिरक्षा प्रणाली सबैले UC को विकासमा योगदान पुर्‍याउँछन्।३ अहिले पनि, UC को कुनै उपचार छैन, र उपचारको लक्ष्य क्लिनिकल रूपमा क्लिनिकल लक्षणहरू नियन्त्रण गर्नु, माफी प्रेरित गर्नु र कायम राख्नु, म्यूकोसल उपचारलाई बढावा दिनु, र पुनरावृत्ति कम गर्नु हो।शास्त्रीय उपचारहरूमा एमिनोस्यालिसिलेट्स, कोर्टिकोस्टेरोइड्स, इम्युनोसप्रेसेन्ट्स, र बायोलोजिक्स समावेश छन्।यद्यपि, यी औषधिहरूले तिनीहरूको विभिन्न साइड इफेक्टहरूको कारणले इच्छित प्रभाव प्राप्त गर्न सक्दैनन्।४ हालै, धेरै केस स्टडीहरूले देखाएका छन् कि परम्परागत चिनियाँ औषधि (TCM) ले ठूलो सम्भावना देखाएको छ। कम विषाक्तता भएको UC लाई कम गर्न मद्दत गर्दै, नयाँ TCM थेरापीहरूको विकास UC.5-7 को लागि एक आशाजनक उपचार रणनीति हो भन्ने सुझाव दिन्छ।
बानलान्जेन ग्रान्युल (BLG) बानलान्जेन जराको पानीको अर्कबाट बनेको परम्परागत चिनियाँ औषधि तयारी हो।8 यसको एन्टिभाइरल प्रभावकारिताको अतिरिक्त, BLG ले विभिन्न सूजन अवस्थाहरूको उपचारमा सम्भावित एन्टी-इन्फ्लेमेटरी गतिविधि प्रदर्शन गर्दछ।9,10 थप रूपमा, ग्लुकोसिनोलेट्स (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin र glucoside लाई रेडिक्स इसाटिडिसको जलीय अर्कबाट अलग गरिएको छ र पहिचान गरिएको छ) र न्यूक्लियोसाइडहरू (हाइपोक्सान्थाइन, एडेनोसिन, युरिडिन र गुआनोसिन) र इन्डिगो र इन्डिरुबिन जस्ता इन्डिगो एल्कालोइडहरू।11,12 अघिल्ला अध्ययनहरूले राम्रोसँग दस्तावेजीकरण गरेका छन् कि एडेनोसिन, युरिडिन र इन्डिरुबिन यौगिकहरूले कोलाइटिसको विभिन्न पशु मोडेलहरूमा शक्तिशाली एन्टी-कोलाइटिस प्रभावहरू प्रदर्शन गर्छन्।13-17 यद्यपि, कोलाइटिसमा BLG को प्रभावकारिता मूल्याङ्कन गर्न कुनै प्रमाण-आधारित अध्ययनहरू सञ्चालन गरिएको छैन।हालको अध्ययनमा, हामीले डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट (DSS)-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिंग कोलाइटिसमा BLG को सुरक्षात्मक प्रभावको अनुसन्धान गर्यौं। C57BL/6 मुसाहरूमा गरिएको अध्ययनमा BLG को मौखिक प्रशासनले मुसामा DSS-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलोनलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गरेको पत्ता लाग्यो, यसको नियामक संयन्त्रहरू पेटको माइक्रोबायोटाको मोड्युलेसन र पेटबाट व्युत्पन्न ग्लुकागन-जस्तो पेप्टाइड-१ (GLP-1) उत्पादनको पुनर्स्थापनासँग सम्बन्धित छन्।
BLG ग्रेन्युलहरू (चिनी-रहित, NMPA-अनुमोदित Z11020357; बेइजिङ टोंगरेन्टाङ टेक्नोलोजी डेभलपमेन्ट कं, लिमिटेड, बेइजिङ, चीन; ब्याच नम्बर: २०११०९६६) फार्मेसीहरूबाट खरिद गरिएको थियो। DSS (आणविक तौल: ३६,०००–५०,००० डाल्टन) MP बायोलोजिक्स (सान्ता एना, संयुक्त राज्य अमेरिका) बाट खरिद गरिएको थियो। सल्फासालाजिन (SASP) (≥ ९८% शुद्धता), हेमेटोक्सिलिन र इओसिन सिग्मा-एल्ड्रिच (सेन्ट लुइस, MO, संयुक्त राज्य अमेरिका) बाट खरिद गरिएको थियो। माउस TNF-α, IL-1β र IL-6 ल्युमिनेक्स एलिसा परख किटहरू R&D प्रणालीहरू (मिनियापोलिस, MN, संयुक्त राज्य अमेरिका) बाट खरिद गरिएको थियो। एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, र ब्युटिरिक एसिड अलादिन इन्डस्ट्रीज (शाङ्घाई, चीन) बाट खरिद गरिएको थियो। २-इथिलब्युटिरिक एसिड मर्क KGaA (डार्मस्ट्याड, जर्मनी) बाट खरिद गरिएको थियो।
६-८ हप्ता उमेरका भाले C57BL/6 मुसाहरू (शरीरको तौल १८-२२ ग्राम) बेइजिङ वेटाहे प्रयोगशाला पशु प्रविधि कम्पनी लिमिटेड (बेइजिङ, चीन) बाट खरिद गरिएको थियो र १२ घण्टा प्रकाश/अँध्यारो चक्रको साथ २२ ± २ डिग्री सेल्सियसको वातावरणमा राखिएको थियो। नयाँ वातावरणमा अभ्यस्त हुन मुसाहरूलाई एक हप्ताको लागि पिउने पानीमा नि:शुल्क पहुँचको साथ मानक मुसा आहार खुवाइयो। त्यसपछि मुसाहरूलाई अनियमित रूपमा चार समूहमा विभाजन गरियो: नियन्त्रण समूह, DSS मोडेल समूह, SASP-उपचार गरिएको समूह (२०० मिलीग्राम/किग्रा, मौखिक) र BLG-उपचार गरिएको समूह (१ ग्राम/किग्रा, मौखिक)। चित्र १A मा देखाइएझैं, हाम्रो अघिल्लो अध्ययन अनुसार, प्रयोगात्मक क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिस मुसाहरूमा १.८% DSS को तीन चक्रहरूद्वारा ५ दिनको लागि प्रेरित गरिएको थियो, त्यसपछि ७ दिनको लागि आसुत पानीद्वारा, हाम्रो अघिल्लो अध्ययन अनुसार। १८ SASP र BLG उपचार गरिएका समूहहरूमा मुसाहरूलाई क्रमशः SASP र BLG ले उपचार गरिएको थियो, हरेक दिन दिन ० देखि सुरु गर्दै। अनुसार प्रारम्भिक प्रयोगहरूमा, BLG को खुराक १ ग्राम/किग्रा सेट गरिएको थियो। यसैबीच, साहित्य अनुसार SASP को खुराक २०० मिलीग्राम/किग्रा सेट गरिएको थियो। ४ नियन्त्रण र DSS मोडेल समूहहरूले प्रयोगभरि समान मात्रामा पानी प्राप्त गरे।
चित्र १ BLG ले मुसामा DSS-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिसलाई सुधार गर्छ। (A) पुरानो आवर्ती कोलाइटिस र उपचारको प्रयोगात्मक डिजाइन, (B) शरीरको तौल परिवर्तन, (C) रोग गतिविधि सूचकांक (DAI) स्कोर, (D) कोलोन लम्बाइ, (E) कोलोनको प्रतिनिधि छवि, (F) H&E स्टेनिङ कोलोन (म्याग्निफिकेसन, ×100) र (G) हिस्टोलोजिकल स्कोर। डेटा औसत ± SEM (n = 6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।##p < 0.01 वा ###p < 0.001 बनाम नियन्त्रण (Con) समूह; *p < 0.05 वा **p < 0.01 वा ***p < 0.001 बनाम DSS समूह।
शरीरको तौल, दिसाको स्थिरता, र मलाशयबाट हुने रक्तस्राव दैनिक रेकर्ड गरिएको थियो। रोग गतिविधि सूचकांक (DAI) पहिले वर्णन गरिए अनुसार शरीरको तौल, दिसाको स्थिरता, र मलाशयबाट हुने रक्तस्रावको स्कोर संयोजन गरेर निर्धारण गरिएको थियो।19 प्रयोगको अन्त्यमा, सबै मुसाहरूलाई युथनाइज गरियो र थप प्रयोगहरूको लागि रगत, दिसा र कोलोन सङ्कलन गरियो।
कोलोन टिस्युलाई फर्मालिन-फिक्स गरिएको थियो र प्याराफिनमा इम्बेड गरिएको थियो। ५-माइक्रोन खण्डहरू बनाइएका थिए र हेमेटोक्सिलिन-इओसिन (H&E) ले दाग लगाइएका थिए, त्यसपछि अन्धा पारिएका थिए र पहिले वर्णन गरिए अनुसार स्कोर गरिएको थियो।१९
कोलोन टिस्युको कुल आरएनए ट्राइजोल अभिकर्मक (इन्भिट्रोजन, कार्ल्सबाड, क्यालिफोर्निया) द्वारा निकालिएको थियो, त्यसपछि रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज (टाकारा, कुसात्सु, शिगा, जापान) को साथ cDNA निकासी गरिएको थियो। SYBR ग्रीन मास्टर (रोचे, बासेल, स्विट्जरल्याण्ड) को साथ वास्तविक-समय PCR प्रणाली प्रयोग गरेर मात्रात्मक PCR प्रदर्शन गरिएको थियो। लक्षित जीन ट्रान्सक्रिप्टहरूलाई β-actin मा सामान्यीकृत गरिएको थियो र 2-ΔΔCT विधि प्रयोग गरेर डेटा विश्लेषण गरिएको थियो। जीन प्राइमर अनुक्रमहरू तालिका १ मा देखाइएको छ।
पहिले वर्णन गरिए अनुसार प्राथमिक मुसा कोलोनिक एपिथेलियल सेल आइसोलेसन र कल्चर गरिएको थियो।20 छोटकरीमा, ६-८ हप्ता पुरानो मुसाको कोलोन पहिले ग्रीवा विस्थापन द्वारा बलिदान पछि निकालिएको थियो, त्यसपछि अनुदैर्ध्य रूपमा खोलिएको थियो, ह्यान्क्स ब्यालेन्स्ड साल्ट सोल्युसन (HBSS, क्याल्सियम र म्याग्नेसियम बिना) संग उपचार गरिएको थियो र ०.५-१ मिमी साना टुक्राहरूमा काटिएको थियो। त्यसपछि, तन्तुहरूलाई ०.४ मिलीग्राम/एमएल कोलाजेनेज XI (सिग्मा, पूल, युके) को साथ नि:शुल्क DMEM माध्यममा पचाइएको थियो र कोठाको तापक्रममा ५ मिनेटको लागि ३०० xg मा सेन्ट्रीफ्यूज गरिएको थियो। गोलीलाई DMEM माध्यममा (१०% भ्रूण गोवाइन सीरम, १०० युनिट/एमएल पेनिसिलिन, र १०० µg/एमएल स्ट्रेप्टोमाइसिनको साथ पूरक) ३७ डिग्री सेल्सियसमा पुन: निलम्बन गर्नुहोस् र नायलन जाल (छिद्र आकार ~२५० µm) मार्फत जानुहोस्। कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूको एलिकोटहरू गिलास-तलको भाँडामा राखिएका थिए र एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, ब्युटिरिक एसिड, र मुसाको दिसाको अर्कलाई ३७ डिग्री सेल्सियस, ५% CO2 मा २ घण्टाको लागि।
कोलोन टिस्युलाई PBS सँग एकरूप बनाइएको थियो, र लुमिनेक्स ELISA परख किटहरू (R&D प्रणालीहरू, मिनियापोलिस, MN, USA) प्रयोग गरेर कोलोन टिस्युमा साइटोकाइन IL-6, TNF-α र IL-1β को स्तर पत्ता लगाइएको थियो। त्यस्तै गरी, प्राथमिक म्युरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूको सीरम र कल्चर माध्यममा GLP-1 स्तरहरू निर्माताको निर्देशन अनुसार ELISA किट (बायोसवाम्प, वुहान, चीन) मार्फत निर्धारण गरिएको थियो।
दिसाबाट कुल डीएनए डीएनए एक्स्ट्र्याक्शन किट (टियानजेन, चीन) प्रयोग गरेर निकालिएको थियो। डीएनएको गुणस्तर र मात्रा क्रमशः २६० एनएम/२८० एनएम र २६० एनएम/२३० एनएमको अनुपातमा मापन गरिएको थियो। त्यसपछि, प्रत्येक निकालिएको डीएनएलाई टेम्प्लेटको रूपमा प्रयोग गरेर, विभिन्न क्षेत्रहरूमा १६S आरआरएनए जीनको V3-V4 क्षेत्रहरूलाई प्रवर्द्धन गर्न विशिष्ट प्राइमरहरू ३३८F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) र ८०६R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) प्रयोग गरिएको थियो। पीसीआर उत्पादनहरू QIAquick Gel एक्स्ट्र्याक्शन किट (QIAGEN, जर्मनी) प्रयोग गरेर शुद्ध पारिएको थियो, वास्तविक-समय PCR द्वारा परिमाणित गरिएको थियो, र IlluminaMiseq PE300 सिक्वेन्सिङ प्लेटफर्म (Illumina Inc., CA, USA) प्रयोग गरेर अनुक्रमित गरिएको थियो। बायोइन्फर्मेटिक्स विश्लेषणको लागि, पहिले रिपोर्ट गरिएको प्रोटोकलहरू पछ्याएर डेटा प्रशोधन गरिएको थियो। २१,२२ छोटकरीमा, कच्चा एक्सप्रेस फाइलहरू फिल्टर गर्न Cutadapt (V1.9.1) प्रयोग गर्नुहोस्। OTU हरूलाई प्रयोग गरेर क्लस्टर गरिएको थियो UPARSE (संस्करण ७.०.१००१) ९७% को समानता कटअफको साथ, र UCHIME लाई काइमेरिक अनुक्रमहरू हटाउन प्रयोग गरिएको थियो। SILVA राइबोसोमल RNA जीन डाटाबेसको आधारमा RDP वर्गीकरणकर्ता (http://rdp.cme.msu.edu/) प्रयोग गरेर समुदाय संरचना विश्लेषण र वर्गीकरण गरिएको थियो।
छोटो-चेन फ्याटी एसिड (एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, र ब्युटिरिक एसिड) को स्तरहरू पहिले ताओ एट अल द्वारा वर्णन गरिए अनुसार मापन गरिएको थियो, केही परिमार्जनहरू सहित।23 संक्षेपमा, १०० मिलीग्राम मललाई पहिले ०.४ एमएल डिआयोनाइज्ड पानीमा निलम्बन गरिएको थियो, त्यसपछि ०.१ एमएल ५०% सल्फ्यूरिक एसिड र ०.५ एमएल २-इथिलब्युटिरिक एसिड (आन्तरिक मानक) राखिएको थियो, त्यसपछि एकरूप बनाइएको थियो र ४ डिग्री सेल्सियसमा तताइएको थियो। C मा १५ मिनेटको लागि १२,००० rpm मा सेन्ट्रीफ्यूज। सुपरनेटेन्टलाई ०.५ एमएल ईथरले निकालिएको थियो र विश्लेषणको लागि GC मा इन्जेक्सन गरिएको थियो। ग्यास क्रोमेटोग्राफी (GC) विश्लेषणको लागि, नमूनाहरू ज्वाला आयनीकरण डिटेक्टर (FID) ले सुसज्जित GC-2010 प्लस ग्यास क्रोमेटोग्राफ (Shimadzu, Inc.) प्रयोग गरेर विश्लेषण गरिएको थियो। ZKAT-624 स्तम्भ, ३० m × ०.५३ mm × ०.३ μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China) प्रयोग गरेर पृथकीकरण प्राप्त गरिएको थियो। GC समाधान सफ्टवेयर (Shimadzu, Inc.) प्रयोग गरेर डेटा प्राप्त गरिएको थियो। विभाजन अनुपात १०:१ थियो, वाहक ग्यास नाइट्रोजन थियो, र प्रवाह दर ६ mL/मिनेट थियो। इंजेक्शनको मात्रा १ μL थियो। इन्जेक्टर र डिटेक्टरको तापक्रम ३००°C थियो। ओभनको तापक्रम १४०°C मा १३.५ मिनेटको लागि राखिएको थियो, त्यसपछि बढाइएको थियो। १२०°C/मिनेटको दरले २५०°C; तापक्रम ५ मिनेटको लागि राखिएको थियो।
डेटालाई औसत ± माध्यको मानक त्रुटि (SEM) को रूपमा प्रस्तुत गरिन्छ। डेटाको महत्त्व एकतर्फी ANOVA द्वारा मूल्याङ्कन गरिएको थियो र त्यसपछि डंकनको बहु-दायरा परीक्षण गरिएको थियो। सबै गणनाहरूको लागि ग्राफप्याड प्रिज्म ५.० सफ्टवेयर (ग्राफप्याड सफ्टवेयर इंक, सान डिएगो, CA, USA) प्रयोग गरिएको थियो र p < ०.०५ लाई तथ्याङ्कीय रूपमा महत्त्वपूर्ण मानिएको थियो।
यो सबैलाई थाहा छ कि UC एक पुरानो रिल्याप्सिङ कोलाइटिस रोग हो जसमा गम्भीर पेट दुखाइ, पखाला र रक्तस्राव हुन्छ।त्यसकारण, BLG (चित्र 1A) को एन्टी-कोलाइटिस प्रभावकारिताको मूल्याङ्कन गर्न मुसाहरूमा DSS-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिस स्थापना गरिएको थियो।नियन्त्रण समूहको तुलनामा, DSS मोडेल समूहका मुसाहरूले शरीरको तौल र उच्च DAI उल्लेखनीय रूपमा घटाएका थिए, र BLG उपचारको 24 दिन पछि यी परिवर्तनहरू उल्लेखनीय रूपमा उल्टिएका थिए (चित्र 1B र C)। कोलन छोटो पार्नु UC को एक महत्त्वपूर्ण विशेषता हो।चित्र 1D र E मा देखाइएझैं, DSS प्राप्त गर्ने मुसाहरूको कोलन लम्बाइ उल्लेखनीय रूपमा छोटो पारिएको थियो, तर BLG उपचारद्वारा राहत दिइएको थियो।पछि, कोलोनिक सूजनको मूल्याङ्कन गर्न हिस्टोपाथोलोजिकल विश्लेषण गरिएको थियो।H&E दाग भएका छविहरू र प्याथोलोजिकल स्कोरहरूले DSS प्रशासनले कोलोनिक वास्तुकलालाई उल्लेखनीय रूपमा बाधा पुर्‍यायो र क्रिप्ट विनाशको परिणामस्वरूप भयो, जबकि BLG उपचारले क्रिप्ट विनाश र प्याथोलोजिकल स्कोरहरूलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्यो (चित्र 1F र G)।उल्लेखनीय रूपमा, 1 g/Kg को खुराकमा BLG को सुरक्षात्मक प्रभाव तुलनात्मक थियो। २०० मिलीग्राम/किग्राको खुराकमा SASP। सामूहिक रूपमा, यी निष्कर्षहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG मुसाहरूमा DSS-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिसको गम्भीरता कम गर्न प्रभावकारी छ।
TNF-α, IL-1β र IL-6 कोलोनिक सूजनको महत्त्वपूर्ण सूजन मार्करहरू हुन्। चित्र 2A मा देखाइए अनुसार, DSS ले नियन्त्रण समूहको तुलनामा कोलोनमा TNF-α, IL-1β र IL-6 को जीन अभिव्यक्तिमा उल्लेखनीय वृद्धि गर्‍यो। BLG को प्रशासनले यी DSS-मध्यस्थता परिवर्तनहरूलाई उल्लेखनीय रूपमा उल्टाउन सक्छ। अर्को, हामीले कोलोन टिस्युमा सूजन साइटोकाइन TNF-α, IL-1β, र IL-6 को स्तर निर्धारण गर्न ELISA प्रयोग गर्‍यौं। परिणामहरूले यो पनि देखाए कि DSS सँग उपचार गरिएको मुसाहरूमा TNF-α, IL-1β, र IL-6 को कोलोनिक स्तर उल्लेखनीय रूपमा बढेको थियो, जबकि BLG उपचारले यी वृद्धिहरूलाई कम गर्‍यो (चित्र 2B)।
चित्र २ BLG ले DSS-उपचार गरिएको मुसाको कोलोनमा प्रोइन्फ्लेमेटरी साइटोकाइन TNF-α, IL-1β र IL-6 को जीन अभिव्यक्ति र उत्पादनलाई रोक्छ। (A) TNF-α, IL-1β र IL-6 को कोलोनिक जीन अभिव्यक्ति; (B) TNF-α, IL-1β र IL-6 को कोलोनिक प्रोटीन स्तर। डेटा औसत ± SEM (n = 4–6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।#p < 0.05 वा ##p < 0.01 वा ###p < 0.001 बनाम नियन्त्रण (Con) समूह; *p < 0.05 वा **p < 0.01 बनाम DSS समूह।
UC.24 को रोगजननमा आन्द्राको डिस्बायोसिस महत्वपूर्ण छ कि छैन भनेर अनुसन्धान गर्न, BLG ले DSS-उपचार गरिएको मुसाको आन्द्राको माइक्रोबायोटालाई मोड्युलेट गर्छ कि गर्दैन भनेर जाँच गर्न, आन्द्राको सामग्रीको ब्याक्टेरिया समुदायको विश्लेषण गर्न 16S rRNA अनुक्रमण गरिएको थियो। भेन रेखाचित्रले देखाउँछ कि तीन समूहहरूले 385 OTU साझा गर्छन्। एकै समयमा, प्रत्येक समूहमा अद्वितीय OTUs थिए (चित्र 3A)। यसबाहेक, चित्र 3B र C मा देखाइएको Chao1 सूचकांक र श्यानन सूचकांकले BLG-उपचार गरिएको मुसामा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको सामुदायिक विविधता घटेको देखाएको छ, किनकि BLG-उपचार गरिएको समूहमा श्यानन सूचकांक उल्लेखनीय रूपमा घटेको थियो। तीन समूहहरू बीच क्लस्टरिङ ढाँचाहरू निर्धारण गर्न प्रमुख घटक विश्लेषण (PCA) र प्रमुख समन्वय विश्लेषण (PCoA) प्रयोग गरिएको थियो र BLG उपचार पछि DSS-उपचार गरिएको मुसाको सामुदायिक संरचना स्पष्ट रूपमा अलग गरिएको देखाएको छ (चित्र 3D र E)। यी तथ्याङ्कहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG उपचारले DSS-प्रेरित कोलाइटिस भएका मुसाको सामुदायिक संरचनालाई उल्लेखनीय रूपमा असर गरेको छ।
चित्र ३ BLG ले DSS-प्रेरित कोलाइटिस भएका मुसाहरूमा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको विविधतालाई परिवर्तन गर्छ। (A) OTU को भेन रेखाचित्र, (B) Chao1 सूचकांक, (C) श्याननको समृद्धि सूचकांक, (D) प्रमुख घटक विश्लेषण (PCA) OTU को स्कोर प्लट, (E) OTU प्रमुख समन्वय विश्लेषण (PCoA) स्कोर चित्र। डेटा औसत ± SEM (n = 6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।**p < 0.01 बनाम DSS समूह।
फेकल माइक्रोबायोटामा विशिष्ट परिवर्तनहरूको मूल्याङ्कन गर्न, हामीले सबै वर्गीकरण स्तरहरूमा पेटको माइक्रोबायोटाको संरचनाको विश्लेषण गर्यौं। चित्र ४A मा देखाइए अनुसार, सबै समूहहरूमा मुख्य फाइला फर्मिक्युट्स र ब्याक्टेरॉइडेट्स थिए, त्यसपछि भेरुकोमाइक्रोबिया थिए। नियन्त्रण मुसाको तुलनामा DSS-उपचार गरिएका मुसाहरूको फेकल माइक्रोबियल समुदायहरूमा फर्मिक्युट्स र फर्मिक्युट्स/ब्याक्टेरोइडेट्स अनुपातको सापेक्षिक प्रचुरतामा वृद्धि भएको थियो, र BLG उपचार पछि यी परिवर्तनहरू उल्लेखनीय रूपमा उल्टाइएका थिए। विशेष गरी, BLG उपचारले DSS-प्रेरित कोलाइटिस भएका मुसाहरूको दिसामा भेरुकोब्याक्टेरियमको सापेक्षिक प्रचुरतामा उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि गर्‍यो। घरेलु स्तरमा, फेकल माइक्रोबियल समुदायहरू Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae र Prevotellaceae (चित्र ४B) द्वारा ओगटेका थिए। DSS समूहको तुलनामा, BLG को कमीले Akkermansiaceae को प्रचुरता बढायो, तर Lachnospiraceae को प्रचुरता घट्यो र रुमिनोकोक्कासी। उल्लेखनीय रूपमा, जीनस स्तरमा, मलको माइक्रोबायोटा Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia र Prevotellaceae_UCG-001 (चित्र 4C) द्वारा ओगटेको थियो। यो खोजले यो पनि देखाएको छ कि BLG उपचारले DSS चुनौतीको प्रतिक्रियामा माइक्रोबायोटा असंतुलनलाई प्रभावकारी रूपमा उल्ट्यायो, जुन Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas र Oscillibacter मा कमी र Akkermansia र Prevotellaceae_UCG-001 मा वृद्धि द्वारा विशेषता हो।
चित्र ४ BLG ले DSS-प्रेरित कोलाइटिस मुसाहरूमा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको प्रचुरतालाई परिवर्तन गर्छ। (A) फाइलम स्तरमा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको प्रचुरता; (B) पारिवारिक स्तरमा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको प्रचुरता; (C) जीनस स्तरमा आन्द्राको माइक्रोबायोटाको प्रचुरता। डेटा औसत ± SEM (n = 6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।#p < ०.०५ वा ###p < ०.००१ बनाम नियन्त्रण (कन) समूह; *p < ०.०५ वा **p < ०.०१ वा ***p < ०.००१ बनाम DSS समूह।
छोटो-चेन फ्याटी एसिड (SCFAs) Akkermansia र Prevotellaceae_UCG-001 का प्रमुख मेटाबोलाइटहरू हुन् भन्ने कुरालाई ध्यानमा राख्दै, जबकि एसीटेट, प्रोपियोनेट र ब्युटाइरेट आन्द्राको लुमेनमा सबैभन्दा प्रचुर मात्रामा SCFA हरू हुन्, 25-27 हामी अझै पनि हाम्रो अध्ययनमा छौं। चित्र 5 मा देखाइए अनुसार, DSS-उपचार गरिएको समूहमा फेकल एसीटेट, प्रोपियोनेट र ब्युटाइरेट सांद्रता उल्लेखनीय रूपमा कम भएको थियो, जबकि BLG उपचारले यो कमीलाई धेरै हदसम्म दबाउन सक्छ।
चित्र ५. BLG ले DSS-प्रेरित कोलाइटिस भएका मुसाहरूको दिसामा SCFAs को स्तर बढाउँछ। (A) दिसामा एसिटिक एसिडको मात्रा; (B) दिसामा प्रोपियोनिक एसिडको मात्रा; (C) दिसामा ब्यूटिरिक एसिडको मात्रा। डेटा औसत ± SEM (n = 6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।#p < ०.०५ वा ##p < ०.०१ बनाम नियन्त्रण (कन) समूह; *p < ०.०५ वा **p < ०.०१ बनाम DSS समूह।
हामीले जीनस-स्तरको भिन्नता SCFA र फेकल माइक्रोबायोटा बीचको पियर्सन सहसम्बन्ध गुणांकको थप गणना गर्यौं। चित्र ६ मा देखाइए अनुसार, अक्करमेन्सिया प्रोपियोनिक एसिड (पियरसन = ०.४८६६) र ब्युटिरिक एसिड (पियरसन = ०.६१९२) को उत्पादनसँग सकारात्मक रूपमा सम्बन्धित थियो। यसको विपरीत, एन्टेरोमोनास र ओसिलोब्याक्टर दुवै एसीटेट उत्पादनसँग नकारात्मक रूपमा सम्बन्धित थिए, पियर्सन गुणांक क्रमशः ०.४७०९ र ०.५१०४ सँग। त्यस्तै गरी, रुमिनोकोक्कासी_यूसीजी-०१४ क्रमशः प्रोपियोनिक एसिड (पियरसन = ०.४५०८) र ब्युटिरिक एसिड (पियरसन = ०.५८४२) को उत्पादनसँग नकारात्मक रूपमा सम्बन्धित थियो।
चित्र ६ विभेदक SCFA र कोलोनिक सूक्ष्मजीवहरू बीचको पियर्सन सहसम्बन्ध विश्लेषण। (A) एसिटिक एसिडको साथ एन्टेरोमोनास; (B) एसिटिक एसिडको साथ कन्कसन ब्यासिलस; (C) अक्करमेन्सिया बनाम प्रोपियोनिक एसिड; (D) प्रोपियोनिक एसिडको साथ रुमिनोकोकस_UCG-014; (E) ब्युटिरिक एसिडको साथ अक्करमेन्सिया; (F) ) ब्युटिरिक एसिडको साथ रुमिनोकोकस _UCG-014।
ग्लुकागन-जस्तै पेप्टाइड-१ (GLP-१) प्रोग्लुकागन (Gcg) को एक कोशिका-प्रकार-विशिष्ट पोस्ट-ट्रान्सलेसनल उत्पादन हो जसमा एन्टी-इन्फ्लेमेटरी गुणहरू छन्।28 चित्र ७ मा देखाइए अनुसार, DSS ले Gcg mRNA अभिव्यक्तिमा उल्लेखनीय कमी ल्यायो। कोलन र BLG उपचारले नियन्त्रण समूह (चित्र ७A) को तुलनामा DSS-प्रेरित Gcg कमीलाई उल्लेखनीय रूपमा उल्टाउन सक्छ। एकै समयमा, DSS-उपचार गरिएको समूहमा सीरममा GLP-1 को स्तर उल्लेखनीय रूपमा घटाइएको थियो, र BLG उपचारले यो कमीलाई धेरै हदसम्म रोक्न सक्छ (चित्र ७B)। छोटो-श्रृंखला फ्याटी एसिडहरूले G-प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर ४३ (GRP43) र G-प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर ४१ (GRP41) सक्रियता मार्फत GLP-1 स्रावलाई उत्तेजित गर्न सक्ने भएकोले, हामीले कोलाइटिस मुसाको कोलोनमा GPR41 र GRP43 को पनि जाँच गर्यौं र पत्ता लगायौं कि DSS चुनौती पछि GRP43 र GPR41 को कोलोनिक mRNA अभिव्यक्ति उल्लेखनीय रूपमा घटेको थियो, र BLG उपचारले प्रभावकारी रूपमा यी बचाउन सक्छ। घट्छ (चित्र ७C र D)।
चित्र ७ BLG ले DSS-उपचार गरिएको मुसामा सीरम GLP-1 स्तर र कोलोनिक Gcg, GPR41 र GRP43 mRNA अभिव्यक्ति बढाउँछ। (A) कोलोन टिस्युमा Gcg mRNA अभिव्यक्ति; (B) सीरममा GLP-1 स्तर; (C) कोलोन टिस्युमा GPR41 mRNA अभिव्यक्ति; (D) कोलोन टिस्युमा GPR43 mRNA अभिव्यक्ति। डेटा औसत ± SEM (n = 5–6) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।#p < 0.05 वा ##p < 0.01 बनाम नियन्त्रण (Con) समूह; *p < 0.05 बनाम DSS समूह।
BLG उपचारले DSS-उपचार गरिएका मुसाहरूमा सीरम GLP-1 स्तर, कोलोनिक Gcg mRNA अभिव्यक्ति, र मल SCFA स्तर बढाउन सक्ने भएकोले, हामीले प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूबाट GLP-1 को रिलीजमा एसीटेट, प्रोपियोनेट, र ब्युटाइरेट साथै नियन्त्रण (F-Con), DSS कोलाइटिस (F-Con) -DSS) र BLG-उपचार गरिएका कोलाइटिस (F-BLG) मुसाहरूको थप जाँच गर्यौं। चित्र 8A मा देखाइए अनुसार, 2 mM एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, र ब्युटाइरिक एसिडले उपचार गरिएका प्राथमिक माउस कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूले क्रमशः GLP-1 रिलीजलाई उल्लेखनीय रूपमा उत्तेजित गरे, अघिल्लो अध्ययनहरूसँग मिल्दोजुल्दो।29,30 त्यस्तै गरी, सबै F-Con, F-DSS, र F-BLG (0.25 ग्राम मल बराबर) ले प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरूबाट GLP-1 को रिलीजलाई धेरै उत्तेजित गरे। उल्लेखनीय रूपमा, F-DSS-उपचार गरिएका प्राथमिक माउस कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरू द्वारा जारी गरिएको GLP-1 को मात्रा भन्दा धेरै कम थियो। F-Con र F-BLG-उपचार गरिएको प्राथमिक मुसा कोलोनिक एपिथेलियल कोशिकाहरू। (चित्र 8B)। यी तथ्याङ्कहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG उपचारले आन्द्राको SCFA-व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादनलाई उल्लेखनीय रूपमा पुनर्स्थापित गर्‍यो।
चित्र ८ BLG-व्युत्पन्न SCFA ले प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोषहरूबाट GLP-1 को रिलीजलाई उत्तेजित गर्दछ। (A) एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, र ब्यूटिरिक एसिडले प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोषहरूबाट GLP-1 को रिलीजलाई उत्तेजित गर्दछ; (B) मल अर्कहरू F-Con, F-DSS र F-BLG ले प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोषहरूलाई उत्तेजित गर्दछ GLP-1 को मात्रा जारी गरियो। कोलोनिक एपिथेलियल कोषहरूको एलिकोटहरू गिलास-तल पेट्री डिशहरूमा राखियो र क्रमशः 2 mM एसिटिक एसिड, प्रोपियोनिक एसिड, ब्यूटिरिक एसिड, र मल अर्कहरू F-Con, F-DSS, र F-BLG (०.२५ ग्राम मलको बराबर) सँग उपचार गरियो। २ घण्टा ३७°C मा, क्रमशः ५% CO2। प्राथमिक मुरिन कोलोनिक एपिथेलियल कोषहरूबाट निस्कने GLP-1 को मात्रा ELISA द्वारा पत्ता लगाइएको थियो। डेटा औसत ± SEM (n = ३) को रूपमा प्रस्तुत गरिएको छ।#p < ०.०५ वा ##p < ०.०१ बनाम खाली वा F-Con; *p < ०.०५ बनाम F-DSS।
संक्षिप्त रूपहरू: एस, एसिटिक एसिड; प्रो, प्रोपियोनिक एसिड; यद्यपि, ब्युटिरिक एसिड; एफ-कन, नियन्त्रण मुसाबाट मलको अर्क; एफ-डीएसएस, कोलाइटिस मुसाबाट मलको अर्क; एफ-बीएलजी, सूजनकारी मुसाको बीएलजी-उपचार गरिएको कोलोन फेकल अर्कबाट।
विश्व स्वास्थ्य संगठनले दुर्दम्य रोगको रूपमा सूचीबद्ध गरेको, UC विश्वव्यापी खतरा बन्दै गइरहेको छ; यद्यपि, रोगको भविष्यवाणी गर्ने, रोकथाम गर्ने र उपचार गर्ने प्रभावकारी विधिहरू अझै सीमित छन्।त्यसकारण, UC को लागि नयाँ सुरक्षित र प्रभावकारी उपचारात्मक रणनीतिहरू अन्वेषण र विकास गर्न तत्काल आवश्यकता छ।परम्परागत चिनियाँ औषधि तयारीहरू एक आशाजनक विकल्प हुन् किनभने धेरै परम्परागत चिनियाँ औषधि तयारीहरू शताब्दीयौंदेखि चिनियाँ जनसंख्यामा UC को उपचारमा प्रभावकारी देखाइएको छ, र तिनीहरू सबै जैविक जैविक र प्राकृतिक सामग्रीहरू हुन् जुन प्रायः मानव र जनावरहरूको लागि हानिकारक छन्।31,32 यो अध्ययनले UC को उपचारको लागि सुरक्षित र प्रभावकारी परम्परागत चिनियाँ औषधि तयारी खोज्ने र यसको कार्य संयन्त्र अन्वेषण गर्ने उद्देश्य राखेको थियो।BLG फ्लूको उपचार गर्न प्रयोग गरिने एक प्रसिद्ध चिनियाँ हर्बल सूत्र हो।8,33 हाम्रो प्रयोगशाला र अन्यमा कामले देखाएको छ कि BLG जस्तै कच्चा पदार्थबाट प्रशोधित परम्परागत चिनियाँ औषधि उत्पादन, इन्डिगोले मानव र जनावरहरूमा UC को उपचारमा महत्त्वपूर्ण प्रभावकारिता प्रदर्शन गर्दछ।4,34 यद्यपि, BLG को एन्टी-कोलाइटिस प्रभावहरू र यसको प्रभावहरू संयन्त्र अस्पष्ट छ।हालको अध्ययनमा, हाम्रा नतिजाहरूले देखाउँछन् कि BLG ले DSS-प्रेरित कोलोनिक सूजनलाई प्रभावकारी रूपमा कम गर्दछ, जुन मोड्युलेसनसँग सम्बन्धित छ। आन्द्राको माइक्रोबायोटाको अध्ययन र आन्द्राबाट व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादनको पुनर्स्थापना।
यो कुरा सबैलाई थाहा छ कि UC मा तौल घट्ने, पखाला लाग्ने, मलाशयबाट रक्तस्राव हुने, र व्यापक कोलोनिक म्यूकोसल क्षति जस्ता विशिष्ट क्लिनिकल विशेषताहरू सहितको अवधि पुनरावृत्ति हुने लक्षणहरू हुन्छन्।35 यसरी, पाँच दिनको लागि 1.8% DSS को तीन चक्रहरू प्रशासित गरेर, त्यसपछि सात दिन पिउने पानी पिएर पुरानो रिल्याप्सिंग कोलाइटिस प्रशासित गरिएको थियो। चित्र 1B मा देखाइए अनुसार, उतारचढावपूर्ण तौल घट्ने र DAI स्कोरहरूले पुरानो रिल्याप्सिंग कोलाइटिसको सफल प्रेरणलाई संकेत गरे। BLG सँग उपचार गरिएका समूहका मुसाहरूले दिन 8 बाट अपशिफ्ट रिकभरी देखाए, जुन दिन 24 भन्दा धेरै फरक थियो। DAI स्कोरमा पनि उही परिवर्तनहरू देखिए, जसले कोलाइटिसको क्लिनिकल सुधारमा सुधारको सुझाव दिन्छ। कोलोन चोट र सूजन स्थितिको सन्दर्भमा, कोलोन लम्बाइ, कोलोन टिस्यु क्षति, र कोलोन टिस्युमा प्रोइन्फ्लेमेटरी साइटोकाइन TNF-α, IL-1β, र IL-6 को जीन अभिव्यक्ति र उत्पादन पनि BLG उपचार पछि धेरै सुधार भएको थियो। सामूहिक रूपमा, यी नतिजाहरूले स्पष्ट रूपमा देखाउँछन् कि BLG मुसाहरूमा क्रोनिक रिल्याप्सिंग कोलाइटिसको उपचारमा प्रभावकारी छ।
BLG ले यसको औषधीय प्रभाव कसरी प्रयोग गर्छ? धेरै अघिल्ला अध्ययनहरूले देखाएका छन् कि पेटको माइक्रोबायोटाले UC को रोगजननमा प्रमुख भूमिका खेल्छ, र माइक्रोबायोम-आधारित र माइक्रोबायोम-लक्षित उपचारहरू UC को उपचारको लागि धेरै आकर्षक रणनीतिको रूपमा देखा परेका छन्। हालको अध्ययनमा, हामीले BLG उपचारले पेटको माइक्रोबायोटा संरचनामा महत्त्वपूर्ण परिवर्तनहरू ल्याएको देखाएका छौं, जसले सुझाव दिन्छ कि DSS-प्रेरित कोलाइटिस विरुद्ध BLG को सुरक्षात्मक प्रभाव पेटको माइक्रोबायोटाको मोड्युलेसनसँग सम्बन्धित छ। यो अवलोकन TCM तयारीहरूको प्रभावकारिता बुझ्नको लागि पेटको माइक्रोबायोटाको होमियोस्टेसिसलाई पुन: प्रोग्राम गर्ने धारणासँग मेल खान्छ।36,37 उल्लेखनीय रूपमा, अक्करमान्सिया एक ग्राम-नेगेटिभ र कडा रूपमा एनारोबिक ब्याक्टेरियम हो जुन पेटको म्यूकस तहमा बस्छ, जसले म्यूकसलाई घटाउँछ, प्रोपियोनिक एसिड उत्पादन गर्छ, गोब्लेट सेल भिन्नतालाई उत्तेजित गर्छ, र म्यूकोसालाई कायम राख्छ। अवरोध अखण्डताको कार्य।26 धेरै क्लिनिकल र पशु डेटाले सुझाव दिन्छ कि अक्करमान्सिया स्वस्थ म्यूकोसासँग अत्यधिक सम्बन्धित छ,38 र अक्करमान्सिया spp को मौखिक प्रशासन। म्यूकोसल सूजनमा उल्लेखनीय रूपमा सुधार गर्न सक्छ।39 हाम्रो हालको तथ्याङ्कले BLG उपचार पछि Akkermansia को सापेक्षिक प्रचुरतामा उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि भएको सुझाव दिन्छ। थप रूपमा, Prevotellaceae_UCG-001 एक SCFA-उत्पादन गर्ने ब्याक्टेरिया हो।27 धेरै अध्ययनहरूले देखाए कि Prevotellaceae_UCG-001 कोलाइटिस भएका जनावरहरूको दिसामा कम सापेक्षिक प्रचुरतामा फेला पर्यो।40,41 हाम्रो हालको तथ्याङ्कले यो पनि देखाउँछ कि BLG उपचारले DSS-उपचार गरिएका मुसाहरूको कोलोनमा Prevotellaceae_UCG-001 को सापेक्षिक प्रचुरतामा उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि गर्न सक्छ। यसको विपरित, Oscillibacter एक मेसोफिलिक, कडा रूपमा एनारोबिक ब्याक्टेरिया हो।42 ले रिपोर्ट गर्यो कि UC मुसाहरूमा Oscillibacter को सापेक्षिक प्रचुरतामा उल्लेखनीय रूपमा वृद्धि भएको थियो र IL-6 र IL-1β स्तरहरू र रोगविज्ञान स्कोरहरूसँग उल्लेखनीय रूपमा सकारात्मक रूपमा सम्बन्धित थियो।43,44 उल्लेखनीय रूपमा, BLG उपचारले DSS-उपचार गरिएका मुसाहरूको दिसामा Oscillibacter को सापेक्षिक प्रचुरतालाई उल्लेखनीय रूपमा घटायो।उल्लेखनीय रूपमा, यी BLG-परिवर्तित ब्याक्टेरियाहरू सबैभन्दा SCFA-उत्पादन गर्ने ब्याक्टेरिया थिए।अनेक अघिल्ला अध्ययनहरूले सम्भाव्यता प्रदर्शन गरेका छन् कोलोनिक सूजन र आन्द्राको उपकलाको अखण्डताको सुरक्षामा SCFAs को लाभदायक प्रभावहरू।45,46 हाम्रो हालको तथ्याङ्कले BLG-उपचार गरिएका मुसाहरूमा DSS-उपचार गरिएका मलमा SCFA एसीटेट, प्रोपियोनेट र ब्युटाइरेटको सांद्रता धेरै बढेको पनि देखाएको छ। सँगै लिँदा, यी निष्कर्षहरूले स्पष्ट रूपमा देखाउँछन् कि BLG उपचारले पुरानो रिल्याप्सिंग कोलाइटिस भएका मुसाहरूमा DSS-प्रेरित SCFA-उत्पादक ब्याक्टेरियालाई प्रभावकारी रूपमा बढाउन सक्छ।
GLP-1 मुख्यतया इलियम र कोलोनमा उत्पादन हुने इन्क्रिटिन हो र यसले ग्यास्ट्रिक खाली गर्न ढिलाइ गर्न र प्रि-प्रेन्डियल रगतमा ग्लुकोज कम गर्न महत्त्वपूर्ण भूमिका खेल्छ।47 प्रमाणले सुझाव दिन्छ कि डिपेप्टिडिल पेप्टिडेज (DPP)-4, एक GLP-1 रिसेप्टर एगोनिस्ट, र एक GLP-1 न्यानोमेडिसिनले मुसाहरूमा आन्द्राको सूजनलाई प्रभावकारी रूपमा कम गर्न सक्छ।48-51 अघिल्लो अध्ययनहरूमा रिपोर्ट गरिए अनुसार, उच्च SCFA सांद्रता मानव र मुसाहरूमा प्लाज्मा GLP-1 स्तरहरूसँग सम्बन्धित थियो। 52 हाम्रो हालको डेटाले देखाउँछ कि BLG उपचार पछि, सीरम GLP-1 स्तर र Gcg mRNA अभिव्यक्ति उल्लेखनीय रूपमा बढेको थियो।त्यस्तै, DSS-उपचार गरिएको कोलाइटिस मुसाहरूबाट मल अर्कको साथ उत्तेजनाको तुलनामा BLG-उपचार गरिएको कोलाइटिस मुसाहरूबाट मल अर्कको साथ उत्तेजन पछि कोलोनिक संस्कृतिहरूमा GLP-1 स्राव उल्लेखनीय रूपमा बढेको थियो।SCFA ले GLP-1 को रिलीजलाई कसरी असर गर्छ? ग्वेन टोलहर्स्ट एट अल। रिपोर्ट गरिएको छ कि SCFA ले GRP43 र GPR41 मार्फत GLP-1 स्रावलाई उत्तेजित गर्न सक्छ।29 हाम्रो हालको तथ्याङ्कले यो पनि देखाउँछ कि BLG उपचारले DSS-उपचार गरिएको मुसाको कोलोनमा GRP43 र GPR41 को mRNA अभिव्यक्तिलाई उल्लेखनीय रूपमा बढाउँछ। यी तथ्याङ्कहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG उपचारले GRP43 र GPR41 सक्रिय गरेर SCFA-प्रवर्द्धित GLP-1 उत्पादन पुनर्स्थापित गर्न सक्छ।
BLG चीनमा दीर्घकालीन ओभर-द-काउन्टर (OTC) औषधि हो। कुनमिङ मुसाहरूमा BLG को अधिकतम सहन सकिने खुराक 80g/Kg हो, र कुनै तीव्र विषाक्तता देखिएको छैन।53 हाल, मानिसहरूमा BLG (चिनी बिना) को सिफारिस गरिएको खुराक 9-15g/दिन (दिनमा 3 पटक) छ।हाम्रो अध्ययनले देखाएको छ कि 1g/Kg मा BLG ले मुसाहरूमा DSS-प्रेरित क्रोनिक रिल्याप्सिङ कोलाइटिसलाई कम गर्छ।यो खुराक क्लिनिकली प्रयोग गरिएको BLG खुराकको नजिक छ।हाम्रो अध्ययनले यो पनि पत्ता लगायो कि यसको कार्य संयन्त्र, कम्तिमा आंशिक रूपमा, पेटको माइक्रोबायोटामा परिवर्तनहरू, विशेष गरी SCFA-उत्पादक ब्याक्टेरिया, जस्तै Akkermansia र Prevotellaceae_UCG-001, पेटबाट व्युत्पन्न GLP-1 उत्पादन पुनर्स्थापित गर्न मध्यस्थता गरिएको छ।यी निष्कर्षहरूले सुझाव दिन्छ कि BLG क्लिनिकल कोलाइटिस उपचारको लागि सम्भावित चिकित्सीय एजेन्टको रूपमा थप विचारको योग्य छ।यद्यपि, यसले पेटको माइक्रोबायोटालाई परिमार्जन गर्ने सही संयन्त्र माइक्रोबायोटा-कमजोरी मुसा र मल ब्याक्टेरिया प्रत्यारोपण द्वारा पुष्टि हुन बाँकी छ।
एस, एसिटिक एसिड; तर, ब्युटिरिक एसिड; BLG, पाण्डन; DSS, डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट; DAI, रोग गतिविधि सूचकांक; DPP, डिपेप्टिडिल पेप्टिडेज; FID, ज्वाला आयनीकरण डिटेक्टर; F-Con, मुसाको मलको अर्क नियन्त्रण; F-DSS, DSS कोलाइटिस मुसाको मलको अर्क; F-BLG, BLG-उपचार गरिएको कोलाइटिस मुसाको मलको अर्क; GLP-1, ग्लुकागन-जस्तै पेप्टाइड-1; Gcg, ग्लुकागन; ग्यास क्रोमेटोग्राफी, ग्यास क्रोमेटोग्राफी; GRP43, G प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर 43; GRP41, G प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर 41; H&E, हेमेटोक्सिलिन-इओसिन; HBSS, ह्यान्क्सको सन्तुलित नुन समाधान; OTC, OTC; PCA, प्रमुख घटक विश्लेषण; PCoA, प्रमुख निर्देशांक विश्लेषण; प्रो, प्रोपियोनिक एसिड; SASP, सल्फासालाजिन; SCFA, छोटो-श्रृंखला फ्याटी एसिड; चिनियाँ औषधि, परम्परागत चिनियाँ औषधि; UC, अल्सरेटिभ कोलाइटिस।
सबै प्रयोगात्मक प्रोटोकलहरू पेकिङ विश्वविद्यालय शेन्जेन-हङकङ विज्ञान तथा प्रविधि विश्वविद्यालय मेडिकल सेन्टर (शेन्जेन, चीन) को पशु नीति समितिले संस्थागत दिशानिर्देश र पशु नियमन (नैतिकता नम्बर A2020157) अनुसार अनुमोदन गरेको थियो।
सबै लेखकहरूले अवधारणा र डिजाइन, डेटा प्राप्ति, वा डेटा विश्लेषण र व्याख्यामा महत्त्वपूर्ण योगदान दिए; लेखको मस्यौदा तयार पार्न वा महत्त्वपूर्ण बौद्धिक सामग्रीको आलोचनात्मक परिमार्जन गर्न भाग लिए; हालको जर्नलमा पाण्डुलिपि पेश गर्न सहमत भए; अन्ततः प्रकाशनको लागि संस्करण अनुमोदन गरे; कामका सबै पक्षहरूको लागि जिम्मेवार।
यो कामलाई चीनको राष्ट्रिय प्राकृतिक विज्ञान प्रतिष्ठान (८१५६०६७६ र ८१६६०४७९), शेन्जेन विश्वविद्यालयको प्रथम श्रेणीको परियोजना (८६००००००२१०), शेन्जेन विज्ञान तथा प्रविधि नवप्रवर्तन समिति कोष (JCYJ20210324093810026), र ग्वाङ्डोङ प्रान्तीय चिकित्सा विज्ञान तथा प्रविधि अनुसन्धान कोष (A2020157 र A2020272), गुइझोउ मेडिकल युनिभर्सिटी फार्मेसी गुइझोउ प्रान्तले सहयोग गरेको थियो। यो कि ल्याबोरेटरी (YWZJ2020-01) र पेकिङ युनिभर्सिटी शेन्जेन अस्पताल (JCYJ2018009) द्वारा वित्त पोषित थियो।
१. टाङ बी, झू जे, झाङ बी, एट अल। मुसामा डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित प्रयोगात्मक कोलाइटिसमा एन्टी-इन्फ्लेमेटरी एजेन्टको रूपमा ट्रिप्टोलाइडको चिकित्सीय क्षमता।pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
२. कपलान जीजी। आईबीडीको विश्वव्यापी बोझ: २०१५ देखि २०२५ सम्म। नेट रेभ ग्यास्ट्रोएन्टेरोल हेपाटोल।२०१५;१२:७२०–७२७.डोई: १०.१०३८/एनआरगास्ट्रो.२०१५.१५०
३. पेङ जे, झेङ टीटी, ली जुए, एट अल। बिरुवाबाट प्राप्त एल्कालोइडहरू: सूजन आन्द्रा रोगमा आशाजनक रोग परिमार्जनकर्ताहरू। प्रिफार्माकोलोजी.२०१९;१०:३५१.doi:१०.३३८९/fphar.२०१९.००३५१
४. जिओ हाइटेङ, पेङ जी, वेन बी, एट अल।इन्डिगो नेचुरलिसले मुसामा DSS-प्रेरित कोलाइटिसमा कोलोनिक अक्सिडेटिभ तनाव र Th1/Th17 प्रतिक्रियाहरूलाई रोक्छ।अक्सिड मेड सेल Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
५. चेन एम, डिंग वाई, टोङ जेड. अल्सरेटिभ कोलाइटिसको उपचारमा सोफोरा फ्लेभेसेन्स (सोफोरा फ्लेभेसेन्स) चिनियाँ हर्बल औषधिको प्रभावकारिता र सुरक्षा: क्लिनिकल प्रमाण र सम्भावित संयन्त्र।प्रिफार्माकोलोजी.२०२०;११:६०३४७६.doi:१०.३३८९/fphar.२०२०.६०३४७६
६. काओ फाङ, लिउ जी, शा बेन्क्सिङ, पान एचएफ। प्राकृतिक उत्पादनहरू: सूजन आन्द्रा रोगको उपचारको लागि प्रयोगात्मक रूपमा प्रभावकारी औषधिहरू। कर फार्मास्युटिकल्स।२०१९;२५:४८९३–४९१३.डोइ: १०.२१७४/१३८१६१२८२५६६६१९१२१६१५४२२४
७. झाङ सी, जियाङ एम, लु ए. परम्परागत चिनियाँ औषधिको साथ अल्सरेटिभ कोलाइटिसको सहायक उपचारमा प्रतिबिम्ब। क्लिनिकल रेभ एलर्जी खोप।२०१३;४४:२७४–२८३.doi: १०.१००७/s१२०१६-०१२-८३२८-९
८. ली झोंगटेङ, ली ली, चेन टीटी, एट अल। मौसमी इन्फ्लुएन्जा उपचारमा बानलान्जेन ग्रेन्युलहरूको प्रभावकारिता र सुरक्षा: अनियमित नियन्त्रित परीक्षणको लागि एक अध्ययन प्रोटोकल।ट्रायल.२०१५;१६:१२६.डोई: १०.११८६/s१३०६३-०१५-०६४५-x